公元前40年夏，安東尼回到意大利。此時，安東尼和屋大維之間的矛盾有所緩和，他娶了屋大維的姐姐奧克塔維婭爲妻，以羅馬傳統的聯姻方式鞏固政治上的聯盟。到公元前37年安東尼和屋大維的矛盾加深，安東尼回到東方，準備遠征帕提亞。他以征途艱辛，不宜安置於軍營爲理由，把奧克塔維婭遣送回羅馬。而當安東尼到達安條克，即邀請克利奧帕特拉七世會面，並且，違反羅馬的傳統習慣同克利奧帕特拉七世結婚。
安東尼和克利奧帕特拉七世的結合，並非全由情慾所驅使，而是具有政治目的。安東尼企圖穩定羅馬的東方行省，準備遠征帕提亞，以及同屋大維進行鬥爭，亟需得到埃及在財政上的支援。而克利奧帕特拉七世在埃及托勒密王國發生深刻的社會危機之時，施展種種手腕，包括運用迷惑安東尼的方式，以圖在羅馬的強權之下，維護和發展托勒密王國，加強和擴大自己的統治權力。爲了滿足克利奧帕特拉七世的野心，安東尼把敘利亞中部地區、腓尼基沿岸一些城市、塞浦路斯島，以及納巴特王國部分地區等，贈給克利奧帕特拉七世。克利奧帕特拉七世支持安東尼遠征帕提亞，結果未能獲勝。公元前34年，安東尼出征亞美尼亞得勝後，不是在羅馬而是在埃及的亞歷山大里亞，按照埃及的禮儀來舉行凱旋式，兩人同登黃金做成的王座，克利奧帕特拉稱爲“諸王之女王”，其子托勒密十五世稱爲“諸王之王”。安東尼在東方的所作所爲，特別是他與克利奧帕特拉七世的關係，始而受到羅馬人的非議，繼而激起了他們的惱怒。他們斥責安東尼將羅馬的征服地贈與克利奧帕特拉七世及其子女，準備遷都亞歷山大里亞另建新王朝。在羅馬，人們對克利奧帕特拉七世恨之入骨，認爲她是除了漢尼拔以外構成對羅馬最大威脅的女王。這就使安東尼威信掃地，喪失了國內的有力支持。這一點被屋大維利用，也是造成安東尼在與屋大維斗爭中失敗的原因之一。
公元前32年安東尼和屋大維的矛盾趨於尖銳.完全決裂了。安東尼應克利奧帕特拉七世之求，正式修書遺棄其妻奧克塔維婭。屋大維也發誓爲其姐所受的侮辱報仇。他不顧冒犯羅馬的傳統習俗從維斯塔貞女手中取得安東尼放置於神廟中的遺囑，公佈於衆。安東尼的遺囑記述了他對克利奧帕特拉七世及其子女的領土分配，還指令克利奧帕特拉七世將其遺體安葬在亞歷山大里亞。遺囑一公佈，輿論譁然，羣情激憤。據此，元老院和公民大會[特里布斯大會]以侵佔羅馬人民財產爲由，對克利奧帕特拉七世宣戰，並剝奪了安東尼的執政官職務以及其他一切權力。
